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酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）試劑盒檢測(cè)原理及方法

發(fā)布時(shí)間：2022/10/10 10:14:45 閱讀次數(shù)：1621

ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定）是一種基于多孔板的免疫測(cè)定法,將通常作為檢測(cè)成分之一的抗體或樣品吸附在固體表面（此方法采多孔板）.ELISA以相對(duì)低廉的成本,快速定量且靈敏地檢測(cè)分析物,是最簡(jiǎn)單的分析方法之一.此外,ELISA還可輕松改造為更高通量篩選方法,幫助研究人員通過單次運(yùn)行檢測(cè)大量樣品.夾心法直接法和競(jìng)爭(zhēng)法ELISAs

我們的ELISA采用簡(jiǎn)單易用的方法,可用于研究血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清液或裂解液等各種基質(zhì)中的可溶性蛋白標(biāo)志物.包括1000多種“僅供研究使用”的檢測(cè)試劑盒,適用的樣本類型包括人小鼠大鼠等各種動(dòng)物模型（如農(nóng)業(yè)和伴生動(dòng)物）.每份試劑盒都提供特定實(shí)驗(yàn)方案及96孔板所需的試劑.ELISA試劑盒主要為96孔規(guī)格,目標(biāo)物檢測(cè)和定量所需試劑都由廠商提供.采用夾心法直接法和競(jìng)爭(zhēng)法等各種ELISA方法.

夾心法使用針對(duì)同一目標(biāo)抗原不同表位的一對(duì)單克隆抗體(mAb).固定在微孔板中的一抗,用于將蛋白從溶液中提取出來.二抗則用于完成“夾心”,提供表示目標(biāo)抗原存在的信號(hào).試劑盒提供重組形式的已知含量的抗原蛋白,方便用戶建立標(biāo)準(zhǔn)曲線解析樣品信號(hào).我們大部分產(chǎn)品采用的都是這種夾心法ELISA.

直接法和競(jìng)爭(zhēng)法比較少見.直接法先用一種單抗檢測(cè)固定在微孔板上的樣品.然后一抗會(huì)與的酶標(biāo)二抗結(jié)合提供信號(hào).

競(jìng)爭(zhēng)法在微孔板上預(yù)包被已知含量的生物標(biāo)志物.酶標(biāo)抗體與樣品共同孵育,并與預(yù)包被抗體進(jìn)行“競(jìng)爭(zhēng)性”結(jié)合反應(yīng),具體結(jié)果取決于樣品中目標(biāo)物的濃度.于是游離抗體能與微孔板上的抗原結(jié)合,并在樣品洗去后呈現(xiàn)信號(hào).該信號(hào)與目標(biāo)標(biāo)志物的濃度成反比.